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關(guān)于如何鑒定收到的新細(xì)胞是否有污染

更新時間:2019-12-05      點(diǎn)擊次數(shù):4892

一、肉眼觀察以下幾項:
1. 細(xì)胞瓶身:
如果瓶身上沒有裂縫,正常;如果瓶身上有裂縫,則污染幾率非常大。
2. 培養(yǎng)基顏色:
如果培養(yǎng)基顏色是紅色或者粉色,正常;如果是橙色,則可能是污染或者細(xì)胞過密;如果是黃色,則污染幾率非常大。
3. 培養(yǎng)基澄清度:
如果培養(yǎng)基澄清,正常;如果有少許漂浮物,則可能是污染或者有細(xì)胞凋亡;如果培養(yǎng)基很渾濁,甚至出現(xiàn)絮狀物,則污染幾率非常大。


 

二、進(jìn)行顯微鏡下觀察(通常觀察前需先靜置細(xì)胞1-2h)
顯微鏡下可以清晰觀察到細(xì)胞是否有菌類污染,菌類污染通常分為桿菌、球菌和霉菌,為了方便大家分辨,我特地找了之前收到有典型污染的細(xì)胞照片,希望能幫助大家判斷。
1. 桿菌

 

 

 

 

常見的有大腸桿菌,長度通常在2-5um左右。

2. 球菌

 

 

 

 

常見的有葡萄球菌,直徑通常在1-2um左右。

3. 霉菌

 

 

 

 

常見的有毛霉,菌絲寬2-10um左右,長度短則幾十um,長則可達(dá)幾mm。

       需要提醒的是,因為運(yùn)輸過程中細(xì)胞離開了其正常生長所需要的環(huán)境,部分細(xì)胞會出現(xiàn)凋亡或產(chǎn)生細(xì)胞碎片,容易誤認(rèn)為是細(xì)菌污染;另外培養(yǎng)基中的雜質(zhì)纖維也容易誤認(rèn)為是霉菌污染,具體區(qū)分方法如下:

1.細(xì)胞碎片和桿菌
細(xì)胞碎片只會隨著細(xì)胞狀態(tài)的變差而變多,通常增長不快;桿菌則增殖非常快,以常見的大腸桿菌為例,常溫25℃增殖1倍需要40min左右(此數(shù)據(jù)可查閱相關(guān)文獻(xiàn)驗證),培養(yǎng)基很快變黃且渾濁。

2.凋亡細(xì)胞和球菌
凋亡細(xì)胞通常只比正常細(xì)胞小一點(diǎn),只會隨著細(xì)胞狀態(tài)的變差而變多,通常增長不快;球菌則要小很多,且成串或成團(tuán),培養(yǎng)基很快變黃且渾濁。
3.雜質(zhì)纖維和霉菌
雜質(zhì)纖維通常是過濾時殘留的濾紙纖維,或者是酒精棉球上的棉纖維,在不開瓶處理的情況下其數(shù)量不會增長;霉菌的話雖然增殖速度沒有桿菌和球菌快,但還是會有明顯增殖。

 

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